Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Cdc37 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419584
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdc37 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Cdc37, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdc37 Anticorpo (E-4): sc-13129
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdc37 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419584 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cdc37 (ciclo de divisão celular 37) codifica uma co-chaperona conservada da HSP90 que estabiliza e promove a maturação de um amplo conjunto de quinases proteicas, incluindo muitos reguladores das vias de sinalização MAPK e PI3K–AKT. Ao coordenar o dobramento de quinases, a montagem de complexos e a proteostase, a CDC37 influencia a progressão do ciclo celular, as respostas ao estresse e a robustez das redes de sinalização. A perturbação da função de CDC37 pode remodelar os panoramas de fosfo-sinalização e alterar a dependência de vias de chaperonas, tornando-a relevante para estudos de fenótipos celulares impulsionados por quinases e de desequilíbrio de proteostase. Assim, o Cdc37 de camundongo é amplamente utilizado para investigar os circuitos chaperona–quinase no desenvolvimento, na homeostase tecidual e em modelos de sinalização relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Cdc37 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cdc37 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cdc37, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cdc37 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Cdc37.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cdc37 para a investigação da sinalização de Cdc37, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cdc37 críticos para a função Cdc37
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cdc37 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Cdc37 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Cdc37 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cdc37. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Cdc37 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Cdc37 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cdc37 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cdc37 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.