Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdc37 (m): sc-419584
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Cdc37 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Cdc37, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cdc37 Antibody (E-4): sc-13129
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdc37 (m) | sc-419584 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cdc37 (cycle de division cellulaire 37) code un co-chaperon conservé de HSP90 qui stabilise et favorise la maturation d’un large ensemble de kinases protéiques, dont de nombreux régulateurs des voies de signalisation MAPK et PI3K–AKT. En coordonnant le repliement des kinases, l’assemblage des complexes et la protéostasie, CDC37 influence la progression du cycle cellulaire, les réponses au stress et la robustesse des réseaux de signalisation. Une perturbation de la fonction de CDC37 peut remodeler les paysages de signalisation phospho-dépendante et modifier la dépendance aux voies de chaperonnage, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de phénotypes cellulaires pilotés par des kinases et des déséquilibres de la protéostasie. Cdc37 chez la souris est donc largement utilisé pour explorer les circuits chaperon–kinase dans le développement, l’homéostasie tissulaire et des modèles de signalisation liés aux maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdc37 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cdc37 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cdc37, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cdc37 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Cdc37.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cdc37 pour l'étude de la signalisation de Cdc37, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cdc37 essentiels à la fonction de Cdc37
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cdc37 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Cdc37 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Cdc37 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cdc37. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Cdc37 plasmide HDR (m) et le Cdc37 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cdc37 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cdc37 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.