Plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdc37 (h): sc-401574

Présentation

CDC37 code Cdc37, un co-chaperon HSP90 conservé qui sert de plateforme d’assemblage et stabilise un large ensemble de kinases protéiques, soutenant leur maturation, le maintien de leur conformation et leur capacité de signalisation. En coordonnant les interactions entre HSP90 et ses clients, Cdc37 influence des processus clés, notamment la progression du cycle cellulaire, les réponses au stress et la transduction du signal au sein des voies MAPK, PI3K–AKT et d’autres voies dépendantes des kinases. La perturbation de CDC37 peut modifier la protéostasie de kinases oncogéniques et du développement, remodelant les réseaux de phosphorylation et les programmes transcriptionnels en aval. En tant que régulateur de l’homéostasie des kinases, CDC37 est fréquemment étudié dans des contextes de prolifération aberrante, de stress protéotoxique et de reconfiguration des voies de signalisation, pertinents pour la biologie du cancer et d’autres maladies associées aux kinases.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdc37 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CDC37 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CDC37, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CDC37 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Cdc37.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CDC37 pour l'étude de la signalisation de Cdc37, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de CDC37 essentiels à la fonction de Cdc37
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CDC37 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Cdc37 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Cdc37 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CDC37. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Cdc37 plasmide HDR (h) et le Cdc37 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CDC37 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CDC37 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.