Cdc34 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403783-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdc34O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cdc34 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cdc34 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDC34. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdc34 Anticorpo (H-4): sc-28381
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdc34 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403783-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdc34 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403783-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **CDC34** codifica a Cdc34, uma enzima E2 conjugadora de ubiquitina que atua em parceria com ligases E3 do tipo **SCF** (SKP1–CUL1–F-box) para montar cadeias de poliubiquitina ligadas em **K48** e promover a degradação proteassomal de reguladores-chave do ciclo celular e da replicação do DNA. Ao controlar a ubiquitinação de substratos como inibidores de CDK e fatores de licenciamento da replicação, a Cdc34 ajuda a coordenar a progressão **G1/S**, a sinalização de checkpoints e a estabilidade do genoma. A desregulação da atividade ou da expressão de **CDC34** tem sido associada a alterações na proteostase e a programas de proliferação aberrantes observados em diversos contextos relevantes para o câncer, tornando-o um nó útil para estudar dependências da via da ubiquitina. O CDC34 também é explorado para investigar a circuitaria de ligases cullin-RING, a dinâmica da sinalização por ubiquitina e respostas adaptativas ao estresse proteotóxico ou ao estresse replicativo.
Cdc34 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDC34 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDC34. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDC34. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDC34 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.