CD74 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400279-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD74O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD74 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD74 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CD74. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD74 Anticorpo (LN-2): sc-6262
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD74 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400279-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD74 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400279-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD74 codifica a cadeia invariante (Ii), uma proteína transmembrana do tipo II que atua como uma chaperona essencial das moléculas de MHC de classe II em células apresentadoras de antígeno. Ao ocupar a fenda de ligação a peptídeos no retículo endoplasmático e direcionar o tráfego do MHC II por compartimentos endossomais, CD74 favorece o carregamento de peptídeos e a apresentação aos linfócitos T CD4+ como parte da sinalização imune adaptativa. CD74 também atua como componente de receptor na superfície celular para o fator inibidor da migração de macrófagos (MIF), conectando-o a vias a jusante como NF-κB e MAPK, que regulam inflamação, sobrevivência celular e ativação de células imunes. A expressão e a sinalização desreguladas de CD74 têm sido associadas a patologias mediadas pelo sistema imune e são frequentemente estudadas no contexto de neoplasias hematológicas e microambientes inflamatórios.
CD74 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD74 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD74. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD74. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD74 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.