Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CD42c Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403712-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD42cO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD42c (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD42c (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GP1BB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD42c Anticorpo (F-11): sc-377129
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD42c Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403712-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD42c Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403712-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GP1BB codifica a cadeia beta da glicoproteína plaquetária Ib (CD42c), um componente essencial do complexo receptor GPIb-IX-V que medeia a captura inicial (tethering) e a adesão das plaquetas ao fator de von Willebrand sob elevado estresse de cisalhamento. Por meio da coordenação com proteínas adaptadoras do citoesqueleto e nós de sinalização como as quinases da família Src e vias dependentes de PI3K, o CD42c contribui para a ativação plaquetária, respostas pró-coagulantes e formação de trombos. A interrupção genética ou a expressão alterada de GP1BB prejudica a montagem do receptor na superfície e a função plaquetária, associando esse eixo a distúrbios plaquetários hereditários caracterizados por macrotrombocitopenia e fenótipos hemorrágicos. Como resultado, GP1BB é amplamente estudado em modelos de biogênese plaquetária, hemostasia e mecanotransdução relevantes para a biologia vascular e a pesquisa de trombose inflamatória.
CD42c O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GP1BB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GP1BB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GP1BB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GP1BB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.