CD36 Double Nickaseプラスミド (h): sc-400233-NIC

CD36は、マクロファージ、脂肪細胞、血管内皮細胞、血小板に発現する多機能なクラスBスカベンジャー受容体をコードしており、長鎖脂肪酸、酸化リン脂質、トロンボスポンジン1に結合する。脂質取り込みと細胞内輸送の制御を介して、CD36は代謝シグナル伝達、炎症プログラム、そして泡沫細胞形成や酸化ストレス応答に関連する経路を含む自然免疫のパターン認識と接続している。CD36依存的なリガンド認識はマクロファージの極性化や血管恒常性を形作るため、動脈硬化の生物学、インスリン抵抗性、炎症に伴う組織リモデリングの研究における重要なハブとなっている。CD36の発現や活性の変化は血小板活性化や微小血管機能障害とも関連づけられており、心代謝および免疫代謝領域の研究全般にわたる広い重要性を裏づけている。

CD36 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CD36 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CD36内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CD36の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CD36が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。