Particules Lentivirales d'Activation (h) CD21: sc-401352-LAC

CR2 code pour CD21 (récepteur du complément 2), un récepteur de surface enrichi sur les cellules B, qui se lie aux antigènes marqués par C3d et couple les signaux innés du complément à l’immunité humorale adaptative. CD21 agit au sein du complexe co‑récepteur CD19–CD81 pour abaisser les seuils d’activation des cellules B, renforcer la signalisation du BCR et favoriser la capture ainsi que la rétention des antigènes sur les cellules dendritiques folliculaires, modulant ainsi les réactions du centre germinatif. Par ces fonctions, CR2/CD21 influence notamment l’opsonisation dépendante du complément, la maturation des cellules B et la formation de la mémoire immunologique. Une expression ou une signalisation dérégulée de CR2 a été associée à des réponses des cellules B altérées dans des contextes de maladies auto‑immunes et infectieuses, et CR2 est fréquemment utilisé comme marqueur et nœud fonctionnel dans les études de biologie des cellules B.

Les particules d'activation lentivirales CD21 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de CR2 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales CD21 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription CR2, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de CD21. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif CR2 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.