CD13 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401095-NIC

ANPEP codifica o CD13, uma aminopeptidase de alanina dependente de zinco, associada à membrana, expressa em células mieloides, compartimentos endoteliais e diversos tecidos epiteliais, onde regula o processamento de peptídeos extracelulares e o fornecimento de aminoácidos. O CD13 participa do controle proteolítico de peptídeos bioativos e se relaciona com adesão celular, motilidade e remodelamento do microambiente, conectando a atividade enzimática à sinalização inflamatória e à homeostase tecidual. Por seus efeitos no tráfego de leucócitos, em respostas angiogênicas e em redes de proteases, o CD13 é frequentemente usado como marcador funcional de diferenciação mieloide e de estados de ativação celular. A expressão ou atividade desregulada de ANPEP/CD13 tem sido associada a alterações no comportamento de células imunes e em interações estromais associadas a tumores, dando suporte a estudos mecanísticos em inflamação e biologia do câncer.

CD13 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ANPEP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ANPEP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ANPEP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ANPEP interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.