CD100 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405956-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD100O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD100 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD100 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SEMA4D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD100 Anticorpo (C-3): sc-390675
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD100 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405956-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD100 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405956-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SEMA4D codifica o CD100, uma semaforina transmembranar que também existe como um ectodomínio solúvel e atua em sinalização bidirecional por meio de receptores como plexina-B1/B2 e CD72. O CD100 regula a ativação de células imunes, os limiares de sinalização de células B, a produção de citocinas e a migração de leucócitos, além de influenciar a orientação neuronal e respostas angiogênicas por vias associadas a GTPases da família Rho e à PI3K. Por meio desses processos, o CD100 está implicado na modulação das interações entre tumor e sistema imune, no remodelamento tecidual inflamatório e em mecanismos neuroinflamatórios. A desregulação da sinalização SEMA4D/CD100 tem sido associada a alterações na vigilância imunológica e à inflamação patológica em múltiplos contextos de doença.
CD100 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SEMA4D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SEMA4D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SEMA4D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SEMA4D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.