CCDC57 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427913
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CCDC57 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CCDC57, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CCDC57 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-427913 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ccdc57 codifica a proteína CCDC57, contendo domínio coiled-coil, um fator predito associado ao citoesqueleto e a organelas, implicado na organização de processos dependentes de microtúbulos. Proteínas coiled-coil frequentemente atuam como andaimes que sustentam a integridade do centrossomo, o tráfego intracelular e a progressão do ciclo celular, conectando a CCDC57 a vias que regulam a dinâmica do fuso mitótico e a regulação espacial da sinalização. Em sistemas murinos, a perturbação de proteínas nessas redes é comumente estudada quanto a efeitos sobre proliferação, estabilidade do genoma e diferenciação celular. Assim, a CCDC57 é relevante para áreas de pesquisa mecanística que se cruzam com fenótipos do desenvolvimento e defeitos associados a doenças na organização do citoesqueleto e no controle mitótico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CCDC57 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccdc57 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccdc57, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccdc57 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CCDC57.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccdc57 para a investigação da sinalização de CCDC57, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccdc57 críticos para a função CCDC57
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccdc57 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CCDC57 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CCDC57 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccdc57. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CCDC57 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CCDC57 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccdc57 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccdc57 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.