Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO caspase-7 (m): sc-419468
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- caspase-7 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique caspase-7, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: caspase-7 p10 Antibody (B-3): sc-365034
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO caspase-7 (m) | sc-419468 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Casp7** code la caspase-7, une protéase effectrice cystéine-aspartate qui est activée en aval des caspases initiatrices au cours de l’apoptose intrinsèque et extrinsèque. Une fois maturée par clivage, la caspase-7 coupe de nombreux substrats cellulaires afin d’induire la morphologie apoptotique caractéristique et contribue à des programmes de mort cellulaire régulée associés à la signalisation mitochondriale, aux voies des récepteurs de mort et au stress de la protéostase. L’activité de la caspase-7 s’articule également avec la signalisation inflammatoire et immunitaire via des interactions croisées au sein des réseaux de caspases, et peut influencer le remodelage tissulaire ainsi que les réponses au stress cytotoxique. Une apoptose dérégulée impliquant **CASP7** a été associée à des phénotypes pertinents pour la biologie du cancer, la neurodégénérescence et les pathologies immuno-médiées, faisant de **Casp7** un nœud utile pour des études mécanistiques du contrôle du destin cellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO caspase-7 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Casp7 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Casp7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Casp7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine caspase-7.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Casp7 pour l'étude de la signalisation de caspase-7, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Casp7 essentiels à la fonction de caspase-7
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Casp7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le caspase-7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le caspase-7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Casp7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le caspase-7 plasmide HDR (m) et le caspase-7 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Casp7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Casp7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.