Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
caspase-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419468
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- caspase-7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico caspase-7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:caspase-7 p10 Anticorpo (B-3): sc-365034
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
caspase-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419468 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Casp7 de camundongo codifica a caspase-7, uma protease executora cisteína-aspartato que é ativada a jusante das caspases iniciadoras durante a apoptose intrínseca e extrínseca. Após ser processada, a caspase-7 cliva múltiplos substratos celulares para promover a morfologia apoptótica característica e contribui para programas de morte celular regulada ligados à sinalização mitocondrial, às vias de receptores de morte e ao estresse de proteostase. A atividade da caspase-7 se conecta à sinalização inflamatória e imune por meio de interações entre redes de caspases e pode influenciar o remodelamento tecidual e as respostas ao estresse citotóxico. A apoptose desregulada envolvendo CASP7 tem sido implicada em fenótipos relevantes para a biologia do câncer, a neurodegeneração e patologias mediadas pelo sistema imune, tornando Casp7 um nó útil para estudos mecanísticos do controle do destino celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO caspase-7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Casp7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Casp7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Casp7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína caspase-7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Casp7 para a investigação da sinalização de caspase-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Casp7 críticos para a função caspase-7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Casp7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo caspase-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo caspase-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Casp7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo caspase-7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR caspase-7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Casp7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Casp7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.