Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Caper (h): sc-416921
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Caper Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Caper, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Caper Antibody (G-10): sc-376531
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Caper (h) | sc-416921 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
RBM39 code pour la protéine humaine de liaison à l’ARN Caper, un facteur nucléaire d’épissage qui couple la transcription au traitement du pré‑ARNm via des interactions avec des composants du spliceosome et des co‑régulateurs transcriptionnels. Caper contribue aux choix d’épissage alternatif et à des programmes de métabolisme de l’ARN qui façonnent la progression du cycle cellulaire, la différenciation et l’expression génique en réponse au stress. Une activité de RBM39 dérégulée et des profils d’épissage aberrants ont été associés à des sorties de signalisation oncogéniques et à une composition du protéome altérée dans plusieurs contextes tumoraux. Par conséquent, RBM39 est fréquemment étudié pour relier la fonction du spliceosome au remaniement des voies de signalisation et à des mécanismes de maladie basés sur l’ARN, pertinents pour des phénotypes pathologiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Caper (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RBM39 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RBM39, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RBM39 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Caper.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RBM39 pour l'étude de la signalisation de Caper, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de RBM39 essentiels à la fonction de Caper
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RBM39 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Caper plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Caper plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RBM39. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Caper plasmide HDR (h) et le Caper (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RBM39 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RBM39 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.