Calpain 10 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405032-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Calpain 10O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Calpain 10 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Calpain 10 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CAPN10. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Calpain 10 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405032-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Calpain 10 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405032-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAPN10 codifica a calpaína 10, uma protease cisteínica atípica regulada por cálcio, implicada em proteólise limitada que modula a renovação de proteínas, a dinâmica do citoesqueleto e a transdução de sinais. A calpaína 10 tem sido associada à homeostase mitocondrial, à sinalização da insulina e às respostas ao estresse metabólico, influenciando processos como a utilização de glicose e a adaptação celular ao estado nutricional. Variações genéticas e alterações na atividade de CAPN10 foram associadas à suscetibilidade a fenótipos metabólicos, incluindo resistência à insulina e características relacionadas ao diabetes tipo 2, sustentando sua relevância na biologia das doenças metabólicas. Em modelos celulares, a perturbação de CAPN10 é usada para investigar a regulação dependente de protease da função de organelas, da sinalização de estresse e do redirecionamento de vias.
Calpain 10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CAPN10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CAPN10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CAPN10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CAPN10 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.