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CAF-1 p150双切口酶质粒(h) | sc-402472-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAF-1 p150双切口酶质粒(h2) | sc-402472-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHAF1A 编码染色质组装因子1(CAF-1)的 p150 亚基。CAF-1 是一种组蛋白伴侣,在 S 期以及 DNA 损伤发生后,将 H3–H4 沉积到新合成的 DNA 上。CAF-1 p150 协调复制偶联的核小体组装、表观遗传信息的传递,以及修复后染色质结构的恢复,从而将染色质动态与基因组稳定性联系起来。通过与 PCNA 及复制/修复机器的相互作用,CHAF1A 影响 DNA 复制、同源重组以及检查点信号通路。CAF-1 活性失调与复制压力、转录程序改变以及在肿瘤生物学和其他染色质相关疾病模型中观察到的基因组不稳定性表型有关。
CAF-1 p150 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CHAF1A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CHAF1A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CHAF1A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CHAF1A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。