cadherin-8 Double Nickaseプラスミド (h): sc-401576-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- cadherin-8 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- cadherin-8ダブルニカースプラスミド（h）およびcadherin-8ダブルニカースプラスミド（h2）は、CDH8を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
cadherin-8 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401576-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cadherin-8 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401576-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH8は、古典的カドヘリンファミリーに属するカルシウム依存性の細胞間接着分子であるカドヘリン8をコードしており、選択的な神経細胞の認識や安定した細胞間接着の形成を支えます。カドヘリン8は、同種結合（ホモフィリック結合）およびカテニンとの連結を介して、接着帯（アドヘレンスジャンクション）の構築、アクチン細胞骨格の再編成、さらに神経突起の伸長やシナプス結合性に影響する接触依存的なシグナル伝達に寄与します。CDH8の機能は、正常な発生に必要な精密な接着ダイナミクスが求められる組織形態形成や神経回路の構築を制御する経路とも交差しています。CDH8の発現変動や遺伝的多様性は神経発達関連の表現型と関連づけられており、接着と神経ネットワーク形成、ならびに関連疾患の生物学を結び付ける機序を研究するうえで有用な標的となります。
cadherin-8 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CDH8 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CDH8内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CDH8の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CDH8が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。