Plasmide Double Nickase (h) cadherin-8: sc-401576-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) cadherin-8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide cadherin-8 Double Nickase (h) et le plasmide cadherin-8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CDH8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) cadherin-8 | sc-401576-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) cadherin-8 | sc-401576-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH8 code la cadhérine‑8, une molécule d’adhésion cellule‑cellule dépendante du calcium appartenant à la famille des cadhérines classiques, qui favorise la reconnaissance neuronale sélective et la formation de jonctions intercellulaires stables. Grâce à des interactions homophiliques et à son couplage aux caténines, la cadhérine‑8 contribue à l’organisation des jonctions d’adhérence, au remodelage du cytosquelette d’actine et à une signalisation dépendante du contact, qui influence la croissance des neurites et la connectivité synaptique. L’activité de CDH8 s’inscrit à l’interface de voies régissant la morphogenèse tissulaire et l’assemblage des circuits neuronaux, où une dynamique d’adhésion finement contrôlée est nécessaire au développement normal. Des modifications de l’expression de CDH8 ou certaines variations ont été associées à des phénotypes neurodéveloppementaux, ce qui en fait une cible utile pour étudier les mécanismes reliant l’adhésion à la formation des réseaux neuronaux et à la biologie des maladies associées.
cadherin-8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CDH8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CDH8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CDH8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CDH8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.