CA XI CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419451

概要

マウスCar11は炭酸脱水酵素XI（CA XI）をコードしており、炭酸脱水酵素ファミリーの一員です。CA XIは、代謝微小環境における細胞内pHの調節や重炭酸／CO₂の取り扱いに寄与すると考えられていますが、その触媒活性は古典的な炭酸脱水酵素と比べて非典型的であることが報告されています。CA XIの発現は神経組織と関連づけられており、Car11が神経細胞の生理機能やイオン／pH恒常性に関わる過程に関与する可能性が示唆されます。細胞内外の酸塩基バランスへの影響を通じて、Car11は細胞代謝、分化、微小環境への適応に影響する経路と交差し得ます。pH制御の破綻や炭酸脱水酵素ファミリーの発現変化は、実験モデルにおける神経生物学および疾患関連の代謝リモデリングの研究において重要です。

CA XI CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCar11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Car11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Car11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CA XIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CA XIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Car11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CA XIの機能に不可欠なCar11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Car11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CA XI CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCA XI CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Car11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CA XI HDRプラスミド（m）および CA XI HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCar11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCar11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。