Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CA IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419454
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CA IV O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CA IV, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CA IV Anticorpo (H-5): sc-74446
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CA IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419454 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Car4 de camundongo codifica a anidrase carbônica IV (CA IV), uma enzima extracelular ancorada por GPI que catalisa a hidratação reversível do CO₂ em bicarbonato e prótons, auxiliando a regulação local do pH e o transporte de bicarbonato. Ao se acoplar funcionalmente a processos de transporte iônico, a CA IV contribui para a homeostase CO₂/HCO₃⁻, que influencia a fisiologia epitelial e endotelial, as trocas gasosas e o equilíbrio ácido–base do microambiente. A atividade de Car4 é comumente estudada no contexto do manejo de bicarbonato nos pulmões e nos rins, bem como das respostas teciduais a alterações de pH e de níveis de CO₂. A desregulação do tamponamento dependente de anidrase carbônica pode afetar processos ligados à inflamação, ao remodelamento associado à hipóxia e a vias de estresse metabólico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CA IV (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Car4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Car4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Car4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CA IV.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Car4 para a investigação da sinalização de CA IV, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Car4 críticos para a função CA IV
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Car4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CA IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CA IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Car4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CA IV Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CA IV (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Car4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Car4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.