C4BP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419394

概要

マウスC4bpは、C4b結合タンパク質（C4BP）をコードしている。C4BPは可溶性の補体制御因子であり、古典経路およびレクチン経路において活性化C4bに結合し、因子Iによる不活化を促進してC3コンバターゼの形成を抑制する。補体の増幅を抑えることで、C4BPは免疫恒常性の維持に寄与し、免疫複合体やアポトーシス由来物質のクリアランスを支えるとともに、細胞外環境における炎症性シグナル伝達を調節する。C4BPに関わる補体制御の破綻は、過剰な補体活性化が病態に寄与する自己免疫、感染に伴う炎症、組織障害などの状況で示唆されている。補体系の制御ハブとして、C4bpはマウスモデルにおける自然免疫、炎症ネットワーク、宿主—病原体相互作用の研究に有用である。

C4BP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるC4bp遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、C4bp内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、C4bpのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、C4BPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、C4BPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、C4bp欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• C4BPの機能に不可欠なC4bpエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、C4bpゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• C4BP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびC4BP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、C4bp遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  C4BP HDRプラスミド（m）および C4BP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはC4bpホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のC4bp標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。