Plasmide Double Nickase (h) C4BPα: sc-404684-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C4BPα correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C4BPα Double Nickase (h) et le plasmide C4BPα Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant C4BPA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C4BPα Antibody (D-5): sc-398720
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C4BPα | sc-404684-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C4BPα | sc-404684-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C4BPA code la chaîne alpha de la protéine de liaison à C4b (C4BPα), un régulateur soluble des voies classique et des lectines du complément, qui se lie à C4b et accélère la dissociation des convertases de C3 afin de limiter l’amplification du complément. En servant de cofacteur au clivage de C4b médié par le facteur I, C4BPα contribue au maintien de l’homéostasie immunitaire et protège les surfaces de l’hôte d’une inflammation excessive dépendante du complément. C4BPα participe également à l’élimination des complexes immuns et du matériel apoptotique et peut moduler des réponses dépendantes de l’opsonisation à l’interface entre immunité innée et adaptative. Une activité dérégulée de C4BPA/C4BPα a été associée au déséquilibre du complément observé dans des maladies auto-immunes et inflammatoires, ainsi qu’à des mécanismes d’échappement immunitaire associés aux tumeurs, étudiés dans de multiples contextes cancéreux.
C4BPα Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C4BPA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C4BPA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C4BPA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C4BPA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.