Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
c-Mpl Antibody (E-7): sc-377417. Western blot analysis of c-Mpl expression in HeLa (A), K-562 (B) and HCT-116 (C) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
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c-Mpl CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403035
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- c-Mpl CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在c-Mpl基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：c-Mpl: sc-377417，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
c-Mpl CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-403035 | 20 µg | $397.00 |
概述
MPL 编码血小板生成素受体 c‑Mpl，这是一类 I 型细胞因子受体，主要表达于造血干/祖细胞以及巨核细胞谱系，在其中调控自我更新、生存和血小板生成。配体结合后可激活 JAK2 依赖性信号，并下游启动 STAT、PI3K/AKT 和 MAPK/ERK 通路，这些通路在骨髓微环境中协同调控细胞增殖与分化程序。MPL 信号失调及受体功能改变与异常巨核生成和髓系疾病生物学相关，包括与异常细胞因子反应性和干细胞稳态失衡相关的表型。作为一种谱系受限且通路输出明确的受体，c‑Mpl 是解析细胞因子信号传导、造血命运决定以及受体介导的反馈调控的理想研究节点。
c-Mpl CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中MPL基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对MPL基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏MPL开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使c-Mpl蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建MPL缺失的细胞模型，用于c-Mpl信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 c-Mpl 功能至关重要的 MPL 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 MPL 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 c-Mpl CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 c-Mpl CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 MPL 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 c-Mpl HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 c-Mpl HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由MPL同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定MPL靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。