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c-Fgr慢病毒激活颗粒(m) | sc-420347-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Fgr 基因编码 c-Fgr,这是一种 Src 家族的非受体型酪氨酸激酶,在髓系谱系细胞中富集表达,可将免疫受体与整合素信号耦联到下游的磷酸化事件。c-Fgr 参与调控白细胞黏附、趋化、脱颗粒以及吞噬反应等通路,整合来自细胞因子和模式识别受体的信号,从而塑造炎症程序。通过调节细胞骨架动态以及与 MAPK/PI3K 相关的信号节点,Fgr 影响先天免疫细胞的激活与组织浸润。Src 家族激酶活性失调(包括 Fgr 信号改变)与炎症性疾病机制及造血系统恶性肿瘤相关的信号网络有关,因此 Fgr 是机制免疫学研究中的一个有用靶点。
c-Fgr 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Fgr 表达。
c-Fgr 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Fgr转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性c-Fgr表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Fgr 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。