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BSPII双切口酶质粒(h) | sc-402368-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BSPII双切口酶质粒(h2) | sc-402368-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
整合素结合唾液酸蛋白(integrin-binding sialoprotein,IBSP),又称骨唾液酸蛋白II(bone sialoprotein II,BSPII),是一种分泌型、高度磷酸化的 SIBLING 家族糖蛋白,富集于矿化组织并沉积于细胞外基质中。BSPII 通过其 RGD 基序以及与羟基磷灰石的相互作用,促进成骨细胞黏附、基质组织化,并在骨形成与重塑过程中促进羟基磷灰石的成核。IBSP 的活性与整合素介导的信号传导及细胞外基质重塑程序相衔接,从而影响细胞迁移与成骨分化。IBSP/BSPII 表达失调与骨转换异常相关,并常在肿瘤—骨相互作用及骨转移生物学研究中作为标志物和功能调控因子进行考察。
BSPII 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IBSP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IBSP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IBSP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IBSP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。