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Brn-3b/BRN3B/POU4F2慢病毒激活颗粒(h) | sc-400382-LAC | 200 µl | $455.00 |
POU4F2(Brn-3b/BRN3B)是一种 POU 同源盒结构域转录因子,负责调控细胞类型特异性的基因表达程序,在神经元的发育、分化与存活中发挥重要作用。BRN3B 通过结合调控性 DNA 基序并协调转录网络,影响轴突导向、突触成熟以及应激反应相关转录等过程。在人类研究体系中,POU4F2 活性的改变常用于探究神经发育调控与谱系决定的机制,其下游靶基因与凋亡、细胞周期控制及神经元身份维持等通路相连。这些特点使 POU4F2 成为研究神经模型中转录调控回路以及影响神经元命运与抗逆性的疾病相关扰动的一个有用节点。
Brn-3b/BRN3B/POU4F2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 POU4F2 表达。
Brn-3b/BRN3B/POU4F2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在POU4F2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Brn-3b/BRN3B/POU4F2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 POU4F2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。