Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) BNIP-3: sc-419356-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) BNIP-3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BNIP-3 Double Nickase (m) et le plasmide BNIP-3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Bnip3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BNIP-3 Antibody (ANa40): sc-56167
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) BNIP-3 | sc-419356-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) BNIP-3 | sc-419356-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Bnip3* code BNIP‑3, une protéine BH3-only induite par l’hypoxie, localisée aux mitochondries, qui relie les signaux de stress au contrôle qualité mitochondrial. BNIP‑3 favorise la mitophagie et peut influencer la perméabilité mitochondriale, établissant un lien entre la privation d’oxygène et des modifications de la phosphorylation oxydative, de la gestion des espèces réactives de l’oxygène, ainsi que des décisions de destinée cellulaire. Elle s’interface avec des voies régulées par HIF‑1, les protéines de la famille BCL‑2 et la machinerie de l’autophagie telle que LC3, modulant l’adaptation métabolique en situation de stress nutritif ou hypoxique. Une activité dérégulée de BNIP‑3 est impliquée dans des modèles de lésions ischémiques, de neurodégénérescence et de biologie du cancer, où une altération du renouvellement mitochondrial et de la signalisation hypoxique contribue à la pathologie.
BNIP-3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Bnip3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Bnip3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Bnip3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Bnip3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.