Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
BMP-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419346
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BMP-7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BMP-7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BMP-7 Anticorpo (4E7): sc-53917
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BMP-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419346 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Bmp7 codifica a proteína morfogenética óssea 7 (BMP-7), um ligante secretado da superfamília TGF-β que sinaliza por meio de receptores BMP do tipo I/II para ativar SMAD1/5/9 e coordenar programas transcricionais que controlam a morfogênese e a homeostase tecidual. No desenvolvimento do camundongo, a BMP-7 contribui para a organogênese e o estabelecimento de padrões, com papéis proeminentes na formação de rim, olho e esqueleto, além de modular interações epitélio–mesênquima e a remodelação da matriz extracelular. A sinalização dependente de BMP-7 se intersecta com MAPK e outras vias dependentes do contexto para regular decisões de destino celular, proliferação e diferenciação. A atividade desregulada de BMP-7 está ligada a fenótipos de desenvolvimento aberrantes e a respostas fibróticas e inflamatórias alteradas, tornando Bmp7 um alvo comum para estudos mecanísticos em modelos relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BMP-7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Bmp7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Bmp7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Bmp7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BMP-7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Bmp7 para a investigação da sinalização de BMP-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Bmp7 críticos para a função BMP-7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Bmp7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BMP-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo BMP-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Bmp7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BMP-7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR BMP-7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Bmp7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Bmp7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.