BLM hydrolase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404411-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BLM hydrolaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BLM hydrolase (h) e o Plasmídeo Double Nickase BLM hydrolase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BLMH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BLM hydrolase Anticorpo (F-9): sc-166777
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BLM hydrolase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404411-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BLM hydrolase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404411-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BLMH codifica a hidrolase da bleomicina, uma aminopeptidase cisteínica citosólica que catalisa o processamento de peptídeos na extremidade N-terminal e contribui para a renovação intracelular de proteínas e peptídeos. A BLMH participa da proteostase geral e do metabolismo de aminoácidos e tem sido associada ao processamento de peptídeos bioativos, incluindo o beta-amiloide (amiloide-β), ligando sua atividade a vias relevantes para a neurodegeneração e para respostas celulares ao estresse. Alterações na expressão ou na atividade de BLMH têm sido investigadas em contextos de estresse oxidativo, sinalização inflamatória e sensibilidade diferencial à exposição à bleomicina, o que a torna um alvo útil para estudos mecanísticos de desintoxicação e catabolismo de peptídeos. Como uma enzima amplamente expressa, a BLMH serve como modelo para dissecar como a função de peptidases citosólicas se integra às redes de controle de qualidade proteica.
BLM hydrolase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BLMH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BLMH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BLMH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BLMH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.