Barx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419290
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Barx1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Barx1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Barx1 Anticorpo (392.8): sc-81956
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Barx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419290 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Barx1 (BARX homeobox 1) é um fator de transcrição homeobox que ajuda a regular o padrão embrionário e a organogênese em camundongos, com papéis de destaque no desenvolvimento craniofacial e em tecidos derivados do intestino anterior. Ao se ligar ao DNA por meio de seu homeodomínio, Barx1 influencia programas de transcrição que coordenam interações epitélio–mesênquima, especificação do destino celular e remodelamento da matriz extracelular durante a morfogênese. A atividade de Barx1 se cruza com redes de sinalização do desenvolvimento, como as vias Wnt/β-catenina e BMP, nas quais pode moldar resultados de diferenciação e a formação de fronteiras teciduais. A desregulação de redes gênicas associadas a Barx1 é relevante para estudos de malformações congênitas e distúrbios do desenvolvimento que afetam estruturas faciais e gastrointestinais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Barx1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Barx1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Barx1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Barx1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Barx1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Barx1 para a investigação da sinalização de Barx1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Barx1 críticos para a função Barx1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Barx1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Barx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Barx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Barx1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Barx1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Barx1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Barx1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Barx1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.