B7-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419570-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- B7-1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase B7-1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase B7-1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cd80. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:B7-1 Anticorpo (F-7): sc-376012
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
B7-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419570-NIC | 20 µg | $410.00 |
O Cd80 de camundongo codifica o ligante coestimulatório B7-1, uma glicoproteína de superfície expressa principalmente por células apresentadoras de antígeno, que modula a ativação inicial (priming) e a função efetora de células T por meio de interações com CD28 e CTLA-4. A sinalização de CD80 contribui para a formação da sinapse imune, a produção de citocinas e a tolerância periférica, integrando-se a vias que moldam a imunidade adaptativa e as respostas inflamatórias. Alterações na expressão de Cd80 são frequentemente estudadas em contextos de autoimunidade, inflamação crônica, imunidade em transplantes e evasão imune tumoral, nos quais o equilíbrio coestimulatório influencia os fenótipos de doença. Como a regulação da família B7 se cruza com a apresentação de antígenos e a biologia de checkpoints, Cd80 é um alvo comum em estudos mecanísticos de ativação e supressão imunes em modelos murinos.
B7-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cd80 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cd80. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cd80. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cd80 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.