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Atm双切口酶质粒(h) | sc-400192-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Atm双切口酶质粒(h2) | sc-400192-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATM 基因编码丝氨酸/苏氨酸激酶 Atm,是 DNA 损伤应答(DDR)的核心调控因子,主要由 DNA 双链断裂激活。在 MRN 复合体募集后,Atm 会磷酸化 H2AX、TP53、CHK2 和 BRCA1 等关键底物,从而协调细胞周期检查点、DNA 修复通路的选择,以及细胞凋亡或衰老等命运决策。ATM 信号将同源重组(HR)与非同源末端连接(NHEJ)同染色质重塑和复制压力应答整合在一起,以维持基因组稳定性。ATM 的功能受损与神经退行性变及肿瘤易感综合征相关;在基因组不稳定与检查点控制异常等研究背景中,ATM 通路功能障碍也经常被关注。
Atm 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ATM 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATM内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ATM的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ATM基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。