Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ATF4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419228-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATF4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ATF4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ATF4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Atf4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ATF4 Anticorpo (B-3): sc-390063
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATF4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419228-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATF4 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419228-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Atf4 de camundongo codifica o fator de transcrição ativador 4 (ATF4), um fator de transcrição bZIP que coordena programas da resposta integrada ao estresse, controlando o metabolismo de aminoácidos, o equilíbrio redox e a proteostase. O ATF4 é induzido a jusante da fosforilação de eIF2α e interage com a sinalização de estresse do RE/UPR para regular genes envolvidos em autofagia, função mitocondrial e remodelamento transcricional adaptativo. Por meio dessas vias, o ATF4 modula decisões de sobrevivência celular sob privação de nutrientes, estresse oxidativo e hipóxia, com ampla relevância para neurodegeneração, disfunção metabólica, inflamação e biologia tumoral. A perturbação da atividade de Atf4 também está associada a alterações na diferenciação de osteoblastos e na homeostase esquelética, sustentando seu uso em modelos de desenvolvimento e de estresse tecidual.
ATF4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Atf4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Atf4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Atf4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Atf4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.