ASIC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401452
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASIC1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ASIC1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASIC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401452 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ASIC1 (subunidade 1 do canal iónico sensível a ácido) codifica um canal catiônico da família DEG/ENaC, ativado por protões e insensível à voltagem, que se abre em resposta à acidificação extracelular para permitir o influxo de Na⁺ e modular a excitabilidade da membrana. O ASIC1 contribui para a transmissão sináptica, a plasticidade neuronal e a sinalização dependente de pH, integrando-se com vias dependentes de Ca²⁺ e programas de expressão génica regulados pela atividade em células excitáveis. Alterações na atividade do ASIC1 têm sido associadas à neuroinflamação e a respostas de stress excitotóxico em contextos isquémicos e neurodegenerativos, sendo também estudado no processamento sensorial relacionado com a dor. Estas características tornam o ASIC1 humano um alvo útil para dissecar mecanismos de deteção de ácido, homeostase iónica e redes de sinalização acopladas a estímulos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ASIC1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ASIC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ASIC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ASIC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ASIC1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ASIC1 para a investigação da sinalização de ASIC1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ASIC1 críticos para a função ASIC1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ASIC1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ASIC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ASIC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ASIC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ASIC1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ASIC1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ASIC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ASIC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.