Plasmide Double Nickase (h) ArgBP2: sc-405716-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ArgBP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ArgBP2 Double Nickase (h) et le plasmide ArgBP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SORBS2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ArgBP2 Antibody (B-11): sc-514671
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ArgBP2 | sc-405716-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ArgBP2 | sc-405716-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SORBS2 code ArgBP2, une protéine adaptatrice enrichie dans le muscle strié et d’autres tissus soumis à de fortes contraintes mécaniques, qui couple le remodelage du cytosquelette d’actine à la transduction du signal. ArgBP2 contient des domaines SH3 qui servent d’échafaudage à des partenaires riches en proline et intègre des signaux provenant de kinases et de complexes d’adhérence afin de réguler l’organisation des fibres de stress, la dynamique des adhérences focales et l’architecture sarcomérique. Par ses interactions avec des régulateurs du cytosquelette et des composants de la signalisation de la famille Abl, SORBS2 contribue à des voies contrôlant la forme cellulaire, la migration et la fonction contractile. Des altérations de l’expression de SORBS2 ou de la connectivité de son réseau ont été associées à des phénotypes cardiaques et musculaires, et ce gène est étudié dans le contexte du remodelage lié aux cardiomyopathies et de la dérégulation du cytosquelette.
ArgBP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SORBS2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SORBS2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SORBS2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SORBS2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.