APP/Amyloid Precursor Protein Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419170-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- APP/Amyloid Precursor ProteinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase APP/Amyloid Precursor Protein (m) e o Plasmídeo Double Nickase APP/Amyloid Precursor Protein (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para App. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:β-Amyloid Anticorpo (B-4): sc-28365
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
APP/Amyloid Precursor Protein Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419170-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APP/Amyloid Precursor Protein Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419170-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene App em camundongos codifica a proteína precursora do amiloide (APP), uma glicoproteína transmembrana do tipo I transportada pelos sistemas secretor e endocítico, onde sustenta o crescimento de neuritos, a formação de sinapses e a sinalização intracelular. A APP é processada proteoliticamente pelas secretases α, β e γ, o que a vincula à proteólise intramembranar regulada e à geração de fragmentos bioativos que influenciam a homeostase neuronal. Seu processamento se conecta ao tráfego de membranas, à organização de lipid rafts e a vias de sinalização dependentes de cálcio, sendo amplamente estudado no contexto de neurodegeneração. A clivagem desregulada da APP e a alteração na produção de fragmentos são centrais para pesquisas mecanísticas sobre biologia do amiloide, neuroinflamação e disfunção sináptica em modelos da doença de Alzheimer.
APP/Amyloid Precursor Protein O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus App em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de App. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função App. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com App interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.