APP/Amyloid Precursor Protein Plasmídeo de ativação de CRISPR (m): sc-419170-ACT
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- APP/Amyloid Precursor ProteinO plasmídeo de ativação de CRISPR (m)e um mediador da ativação sinergética (SAM) dentro do sistema de ativada da transcrição, criado para a especificamente fazer a regulação genética crescente
- APP/Amyloid Precursor Protein Plasmídeo de ativação CRISPR (m) consiste em 3 pares de plasmídeos com a razão de massa de 1:1:1: um plasmídeo contento o código para Cas9 desativada
- O complexo SAM resultante se liga a uma região especifica a qual contem aproximadamente 200-250 nt na região upstream da região de inicio da transcrição e fornece um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética.
- Os gRNAs codificados pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR APP/Amyloid Precursor Protein (m) e pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR APP/Amyloid Precursor Protein (m2) têm como alvo regiões reguladoras distintas a montante do local de início da transcrição de App. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:β-Amyloid Anticorpo (B-4): sc-28365
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
APP/Amyloid Precursor Protein Plasmídeo de ativação de CRISPR (m) | sc-419170-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
APP/Amyloid Precursor Protein Plasmídeo de ativação de CRISPR (m2) | sc-419170-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
O gene App em camundongos codifica a APP (proteína precursora do amiloide), uma glicoproteína transmembrana do tipo I que sofre proteólise regulada pelas secretases α, β e γ para gerar ectodomínios solúveis e peptídeos amiloidogênicos. A APP participa do desenvolvimento neuronal, do transporte axonal, da organização sináptica e da sinalização dependente de atividade, além de desempenhar papéis adicionais na adesão celular e no tráfego endocítico. Por meio de seu domínio intracelular e de interações com proteínas adaptadoras, a APP conecta a dinâmica de membrana à sinalização MAPK/ERK e a respostas transcricionais. O processamento e o tráfego desregulados de APP são amplamente utilizados como pontos de entrada moleculares para modelar a neurodegeneração associada ao amiloide e neuropatologias relacionadas em sistemas murinos.
APP/Amyloid Precursor Protein O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de App sem alterar a sequência de ADN subjacente.
APP/Amyloid Precursor Protein O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus App em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.
Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição App, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de APP/Amyloid Precursor Protein. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus App nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de APP/Amyloid Precursor Protein no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via APP/Amyloid Precursor Protein em células tumorais com expressão de App silenciada ou reduzida.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.