apoC-II CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419164

概要

マウスApoc2は、アポリポタンパク質C-II（apoC-II）をコードしている。apoC-IIは分泌型アポリポタンパク質であり、リポタンパク質リパーゼに必須の補因子として作用することで、カイロミクロンおよびVLDL中のトリグリセリドの加水分解を促進し、遊離した脂肪酸の末梢組織への取り込みを可能にする。この役割を通じて、apoC-IIは血漿中トリグリセリドのクリアランスと脂質輸送の中核を担い、腸管での脂質吸収および肝臓でのリポタンパク質産生をエネルギー代謝へと結び付けている。APOC2機能の攪乱は、重度の高トリグリセリド血症や異常リポタンパク血症の表現型と関連しており、脂質恒常性やそれに続く代謝ストレス応答を研究するための機序的な切り口を提供する。そのため、Apoc2に焦点を当てたモデルは、リポリシス、脂肪酸フラックス、リポタンパク質リモデリングをつなぐ経路の解析に有用である。

apoC-II CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるApoc2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Apoc2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Apoc2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、apoC-IIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、apoC-IIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Apoc2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• apoC-IIの機能に不可欠なApoc2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Apoc2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• apoC-II CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびapoC-II CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Apoc2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  apoC-II HDRプラスミド（m）および apoC-II HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはApoc2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のApoc2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。