Angiomotin-L2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402027-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Angiomotin-L2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Angiomotin-L2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Angiomotin-L2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AMOTL2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Angiomotin-L2 Anticorpo (A-9): sc-398261
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Angiomotin-L2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402027-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Angiomotin-L2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402027-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMOTL2 codifica a angiomotin-like 2, uma proteína de andaime (scaffold) que se associa a complexos de junções estreitas (tight junctions) e do citoesqueleto de actina para regular a polaridade epitelial, a forma celular e a migração direcionada. A angiomotin-L2 participa do controle da via Hippo ao modular a localização e as saídas transcricionais de YAP/TAZ, influenciando assim a inibição por contato e a mecanotransdução. Por meio dessas funções junctionais e de sinalização, AMOTL2 é relevante para estudos de remodelamento tecidual, comportamento angiogênico e fenótipos associados à invasão frequentemente investigados em câncer e biologia vascular. A atividade desregulada de AMOTL2 tem sido relacionada a alterações na dinâmica de adesão celular e a uma sinalização aberrante de controle do crescimento, o que a torna um alvo útil para dissecar vias em modelos celulares relevantes para doenças.
Angiomotin-L2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AMOTL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AMOTL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AMOTL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AMOTL2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.