Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
AMPK alpha 2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430803-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AMPK alpha 2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AMPK alpha 2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase AMPK alpha 2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Prkaa2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AMPK alpha 2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430803-NIC | 20 µg | $410.00 |
Prkaa2 codifica a subunidade catalítica α2 da proteína quinase ativada por AMP (AMPK), um sensor central do estado energético celular que é ativado pelo aumento de AMP/ADP em relação ao ATP. A AMPKα2 ajuda a coordenar a homeostase metabólica ao fosforilar alvos que promovem a captação de glicose, a oxidação de ácidos graxos e a autofagia, ao mesmo tempo que restringe processos anabólicos como a síntese de lipídios e proteínas, integrando sinais nas vias de LKB1 e CaMKK2 e fazendo interseção com a sinalização de mTOR e de insulina. Em tecidos de camundongo, a AMPKα2 é particularmente relevante para o metabolismo energético do músculo esquelético e do coração e contribui para a adaptação ao estresse energético e para a função mitocondrial. A desregulação da sinalização de AMPK é amplamente estudada em modelos de doenças metabólicas, respostas à isquemia/estresse e fenótipos associados à inflamação, tornando Prkaa2 um alvo comum em estudos mecanísticos.
AMPK alpha 2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Prkaa2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Prkaa2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Prkaa2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Prkaa2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.