AMPK alpha 1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m2): sc-430618-LAC-2
- alvos específicos: mouse
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- AMPK alpha 1 as Partículas de Ativação Lentiviral (m2) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- AMPK alpha 1 As partículas de ativação lentivirais (m2) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo AMPK alpha 1 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m2) e pelo AMPK alpha 1 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m22) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor Prkaa1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: AMPK alpha 1 Anticorpo (H-4): sc-398861
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AMPK alpha 1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m2) | sc-430618-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
O gene murino Prkaa1 codifica a subunidade catalítica AMPK alfa 1, um sensor central de energia que forma o complexo AMPK heterotrimérico e é ativado por fosforilação em condições de baixa energia para coordenar a adaptação metabólica. A AMPKα1 regula a captação de glicose, a oxidação de ácidos graxos, a autofagia e a homeostase mitocondrial por meio de vias que incluem a inibição do mTORC1 e a iniciação da autofagia mediada por ULK1, integrando sinais de LKB1 e CaMKK2. A desregulação da sinalização de Prkaa1/AMPK está implicada na inflamação metabólica, na resistência à insulina, na esteatose hepática e em alterações no metabolismo de células tumorais, conectando respostas ao estresse energético celular a fenótipos relevantes para doenças. A edição gênica de Prkaa1 em modelos murinos sustenta estudos mecanísticos de sensoriamento de nutrientes, reprogramação imunometabólica e controle do crescimento celular em diferentes tecidos e sistemas de células primárias.
As Partículas de Ativação Lentivirais AMPK alpha 1 (m2) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Prkaa1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais AMPK alpha 1 (m2) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Prkaa1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de AMPK alpha 1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Prkaa1 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.