Akt2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400060-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Akt2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Akt2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Akt2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AKT2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Akt2 Anticorpo (F-7): sc-5270
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Akt2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400060-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Akt2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400060-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AKT2 codifica a quinase de serina/treonina Akt2, um efetor central do eixo de sinalização PI3K–AKT que conecta a sinalização por receptores tirosina-quinase e por insulina ao metabolismo, crescimento e sobrevivência celulares. A Akt2 regula a captação de glicose e a síntese de glicogênio por meio da fosforilação de substratos a jusante como AS160/TBC1D4 e GSK3, e contribui para o controle do mTORC1 via TSC2 e PRAS40. Em células humanas, a atividade de AKT2 ajuda a coordenar programas metabólicos responsivos à insulina e pode modular a progressão do ciclo celular, a resistência à apoptose e respostas ao estresse. Alterações na sinalização de AKT2 têm sido implicadas em disfunção metabólica e na reprogramação de vias oncogênicas, nas quais componentes da via PI3K/AKT são frequentemente desregulados.
Akt2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AKT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AKT2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AKT2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AKT2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.