Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) AGS3: sc-426766-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) AGS3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide AGS3 Double Nickase (m) et le plasmide AGS3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Gpsm1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AGS3 Antibody (G-2): sc-271721
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) AGS3 | sc-426766-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Gpsm1** code l’activateur de la signalisation des protéines G 3 (**AGS3**), un régulateur multidomaine qui se lie aux sous-unités **Gαi/o** chargées en GDP via ses motifs **GoLoco** et module le cycle des protéines G hétérotrimériques indépendamment de l’activation canonique par les **RCPG**. AGS3 influence la signalisation des seconds messagers et le trafic des récepteurs, façonnant des voies en aval qui contrôlent la polarité cellulaire, la dynamique vésiculaire et l’organisation du cytosquelette. Dans le système nerveux, AGS3 est associé à la plasticité synaptique et aux réponses adaptatives aux signaux neuromodulateurs, tandis que dans d’autres tissus il contribue, selon le contexte, au contrôle de comportements prolifératifs et migratoires. Les réseaux de signalisation des protéines G impliquant AGS3 lorsqu’ils sont dérégulés sont étudiés dans des phénotypes neurocomportementaux et dans le remodelage des voies de signalisation associé à la biologie tumorale, faisant de **Gpsm1** une cible utile pour l’exploration mécanistique des voies.
AGS3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Gpsm1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Gpsm1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Gpsm1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Gpsm1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.