Adenosine A1-R Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401241-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Adenosine A1-RO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adenosine A1-R (h) e o Plasmídeo Double Nickase Adenosine A1-R (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADORA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Adenosine A1-R Anticorpo (D-5): sc-514337
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adenosine A1-R Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401241-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenosine A1-R Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401241-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADORA1 codifica o receptor humano de adenosina A1 (Adenosine A1-R), um GPCR acoplado à Gi/o que detecta a adenosina extracelular para modular o cAMP intracelular, a atividade de canais iónicos e a sinalização por MAPK. A ativação do A1-R geralmente reduz a libertação de neurotransmissores e influencia a excitabilidade celular, a homeostase metabólica e as respostas à hipóxia e à inflamação através de redes de sinalização purinérgica. A sinalização de ADORA1 cruza-se com as vias da adenilil ciclase/PKA e pode moldar programas transcricionais a jusante via ERK e cascatas de cinases relacionadas. A desregulação do tónus adenosina–A1-R tem sido implicada em diversos processos relevantes para doenças, incluindo excitabilidade neurológica, respostas ao stress associadas à isquemia e regulação inflamatória, sustentando estudos mecanísticos em neurobiologia e imunometabolismo.
Adenosine A1-R O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADORA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADORA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADORA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADORA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.