ADAMTS-15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405885
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADAMTS-15 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ADAMTS-15, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ADAMTS-15 Anticorpo (5F3): sc-517041
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADAMTS-15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405885 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ADAMTS15 codifica a ADAMTS-15, uma metaloproteinase secretada dependente de zinco da família ADAMTS que contribui para a organização da matriz extracelular (MEC) por meio do processamento proteolítico de componentes da matriz e da regulação da remodelação tecidual. Ao moldar microambientes pericelulares ricos em proteoglicanos e colágeno, a ADAMTS-15 influencia a adesão e a migração celulares, bem como vias de mecanotransdução ligadas às interações estroma–epitélio. Alterações na atividade de ADAMTS15 têm sido estudadas em contextos de homeostase da cartilagem e do tecido conjuntivo, remodelação associada à fibrose e dinâmica da MEC relacionada a tumores, nos quais mudanças no equilíbrio entre proteases e inibidores podem afetar a invasão e o potencial metastático. Essas características tornam a ADAMTS-15 um alvo útil para investigar a renovação da matriz, a sinalização do microambiente e redes de proteases em sistemas celulares humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ADAMTS-15 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADAMTS15 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADAMTS15, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADAMTS15 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ADAMTS-15.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADAMTS15 para a investigação da sinalização de ADAMTS-15, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADAMTS15 críticos para a função ADAMTS-15
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADAMTS15 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ADAMTS-15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ADAMTS-15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADAMTS15. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ADAMTS-15 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ADAMTS-15 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADAMTS15 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADAMTS15 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.