Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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ACTR-IIA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418976
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTR-IIA O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ACTR-IIA, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACTR-IIA Anticorpo (D-9): sc-515826
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTR-IIA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418976 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Acvr2a codifica o receptor de activina A tipo IIA (ACTR-IIA), um receptor transmembranar com atividade de quinase de serina/treonina que se liga a activinas e a ligantes relacionados da superfamília TGF-β para regular a transcrição dependente de SMAD2/3. Em células de camundongo, a sinalização de ACTR-IIA influencia o padrão embrionário, a regulação do eixo reprodutivo e a homeostase tecidual ao coordenar programas de diferenciação, proliferação e matriz extracelular. Essa via interage com outros receptores e moduladores da família TGF-β para ajustar respostas específicas ao contexto durante o desenvolvimento e o remodelamento. A desregulação da sinalização activina/ACTR-IIA tem sido implicada no remodelamento fibrótico, em alterações teciduais associadas à inflamação e em controle de crescimento alterado, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de fenótipos associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACTR-IIA (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acvr2a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acvr2a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acvr2a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACTR-IIA.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acvr2a para a investigação da sinalização de ACTR-IIA, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acvr2a críticos para a função ACTR-IIA
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acvr2a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ACTR-IIA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ACTR-IIA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acvr2a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ACTR-IIA Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ACTR-IIA (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acvr2a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acvr2a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.