Plasmide Double Nickase (h) ACTG2: sc-400007-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ACTG2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ACTG2 Double Nickase (h) et le plasmide ACTG2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACTG2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ACTG2 | sc-400007-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ACTG2 | sc-400007-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACTG2 code l’actine γ du muscle lisse, un composant central du cytosquelette d’actine qui soutient la génération de force contractile, la forme cellulaire et la mécanotransduction dans le muscle lisse viscéral. Les filaments contenant ACTG2 interagissent avec la myosine et des protéines liant l’actine afin de coordonner le remodelage du cytosquelette, la dynamique d’adhésion et la signalisation en aval des voies contractiles RhoA/ROCK et dépendantes du calcium. Le bon fonctionnement d’ACTG2 est essentiel à la motricité des muscles lisses gastro-intestinaux et génito-urinaires ainsi qu’au maintien de l’architecture tissulaire. Des variants pathogènes ou une expression dérégulée d’ACTG2 ont été associés à des phénotypes de myopathie viscérale, notamment des troubles affectant le péristaltisme intestinal et la fonction des voies urinaires, ce qui en fait une cible pertinente pour modéliser les mécanismes des maladies du cytosquelette du muscle lisse.
ACTG2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACTG2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACTG2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACTG2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACTG2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.