ACMSD CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-435223

概要

Acmsd は、トリプトファン分解のキヌレニン経路における重要酵素であるアミノカルボキシムコン酸セミアルデヒド脱炭酸酵素（ACMSD）をコードしており、中間代謝産物をキノリン酸の生成から別経路へと振り向け、de novo の NAD⁺ 生合成に影響します。ピコリン酸とキノリン酸の産生バランスを調節することで、ACMSD は細胞のレドックス代謝、ミトコンドリア機能、ならびにアミノ酸センシングに関連する炎症性シグナル伝達に影響し得ます。キヌレニン経路フラックスの変化は、神経炎症、興奮毒性ストレス、代謝調節異常と関連づけられており、Acmsd は中枢神経系（CNS）および末梢組織における機序解明研究の有用な標的となります。マウスモデルでは、Acmsd を攪乱することで、トリプトファン由来代謝物が免疫—代謝クロストークや組織恒常性をどのように形成するかを検討する研究が可能になります。

ACMSD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAcmsd遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Acmsd内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Acmsdのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ACMSDタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ACMSDシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Acmsd欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ACMSDの機能に不可欠なAcmsdエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Acmsdゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ACMSD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびACMSD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Acmsd遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ACMSD HDRプラスミド（m）および ACMSD HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAcmsdホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAcmsd標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。