ACBD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-428356

概要

Acbd6は、細胞質性の脂質結合タンパク質であるアシルCoA結合ドメイン含有6（ACBD6）をコードしており、長鎖アシルCoAエステルと結合して細胞内のアシルCoAの取り扱いを調整するのに寄与します。活性化脂肪酸を緩衝しつつ下流酵素へ受け渡すことで、ACBD6は脂質代謝フラックス、膜脂質リモデリング、ならびに栄養状態を細胞機能へ結び付けるアシル化依存的プロセスに影響を与える立場にあります。アシルCoAの利用可能性が乱れると、ミトコンドリア代謝、酸化ストレス応答、炎症性シグナル伝達に影響し得るため、Acbd6は代謝異常や脂質駆動性の細胞表現型の研究において重要です。したがってマウスACBD6は、肝臓、脂肪組織、免疫細胞など脂質回転の高い組織におけるアシルCoA制御経路を解析するための有用な足がかりとなります。

ACBD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAcbd6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Acbd6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Acbd6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ACBD6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ACBD6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Acbd6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ACBD6の機能に不可欠なAcbd6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Acbd6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ACBD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびACBD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Acbd6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ACBD6 HDRプラスミド（m）および ACBD6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAcbd6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAcbd6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。