ABCG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418933

Descripción general

Abcg1 codifica el transportador de la familia ABC (ATP-binding cassette) ABCG1, un regulador clave de la homeostasis intracelular del colesterol y de los fosfolípidos, que promueve el eflujo de esteroles hacia HDL y favorece la remodelación lipídica de la membrana. En macrófagos y otras células implicadas en el manejo de lípidos, ABCG1 actúa aguas abajo de la señalización LXR/RXR y se coordina con ABCA1 para controlar la carga lipídica, la formación de células espumosas y el tono inflamatorio. La alteración de la actividad de Abcg1 se ha relacionado con una desregulación del metabolismo lipídico, respuestas al estrés oxidativo y fenotipos relevantes para la aterosclerosis en modelos murinos. Además, el equilibrio lipídico mediado por ABCG1 puede influir en la función de las células inmunitarias y en las respuestas celulares al estrés metabólico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ABCG1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Abcg1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Abcg1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Abcg1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ABCG1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Abcg1 para la investigación de la señalización de ABCG1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Abcg1 críticos para la función de ABCG1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Abcg1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ABCG1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ABCG1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Abcg1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ABCG1 (m) y el plásmido HDR ABCG1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Abcg1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Abcg1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.