γ-GCSc慢病毒激活颗粒(m): sc-420573-LAC
- 针对种属：mouse
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- γ-GCSc 慢病毒激活颗粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- γ-GCSc慢病毒激活颗粒(m)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 γ-GCSc 慢病毒激活质粒 (m) 和 γ-GCSc 慢病毒激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 靶向 Gclc 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因激活效率可以用抗体：γ-GCSc Antibody (H-5): sc-390811，通过WB、IF或IHC分析
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γ-GCSc慢病毒激活颗粒(m) | sc-420573-LAC | 200 µl | $455.00 |
Gclc 编码谷氨酸–半胱氨酸连接酶（γ-GCSc）的催化亚基。该酶是从头合成谷胱甘肽过程中限速的关键酶，负责将谷氨酸与半胱氨酸偶联生成 γ-谷氨酰半胱氨酸。通过调控细胞内谷胱甘肽的可用性，γ-GCSc 成为维持氧化还原稳态、清除活性氧（ROS）以及介导细胞对外源性化合物和亲电应激反应的核心调控因子，并与 NRF2 驱动的抗氧化程序及铁死亡敏感性密切相关。在小鼠体系中，改变 Gclc 活性常用于构建肝、肺、脑及免疫细胞的氧化应激生物学模型；其中，谷胱甘肽依赖的缓冲能力会影响线粒体功能、炎症信号传导和代谢适应。谷胱甘肽合成失衡及 Gclc 表达异常与对毒物诱导损伤的易感性有关，也与多种神经退行性、代谢性和炎症性疾病模型中观察到的氧化还原失衡相关。
γ-GCSc 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Gclc 表达。
γ-GCSc 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Gclc转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性γ-GCSc表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Gclc 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。