Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
γ-GCSc Antibody (H-5): sc-390811. Near-Infrared western blot analysis of γ-GCSc expression in A-431 (A) and AMJ2-C8 (B) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 790: sc-516181. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
γ-GCSc双切口酶质粒(m): sc-420573-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- γ-GCSc 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- γ-GCSc双切酶质粒（m）和γ-GCSc双切酶质粒（m2）编码针对Gclc的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：γ-GCSc: sc-390811，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
γ-GCSc双切口酶质粒(m) | sc-420573-NIC | 20 µg | $410.00 |
Gclc 编码谷氨酸‑半胱氨酸连接酶（γ‑GCSc）的催化亚基，该酶是从头合成谷胱甘肽过程中限速步骤的关键酶。γ‑GCSc 通过调控细胞内谷胱甘肽水平，影响氧化还原稳态、电亲性物质与外源化合物的解毒过程，以及硫醇依赖性信号传导的维持。Gclc 的活性与氧化应激反应网络相互关联，其中包括由 NRF2 调控的抗氧化程序，并可影响线粒体功能以及细胞对活性氧的易感性。在生物医学模型中，谷胱甘肽代谢失衡和 Gclc 功能受损与氧化损伤相关表型有关，涉及炎症、神经退行性变、代谢应激以及对毒物敏感性等方面。
γ-GCSc 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Gclc 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Gclc内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Gclc的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Gclc基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。