Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
β2B Tubulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400059
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- β2B Tubulin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico β2B Tubulin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: β2B Tubulin Anticuerpo (AT5B3): sc-517430
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
β2B Tubulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400059 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TUBB2B codifica la β2B-tubulina, un isotipo de β-tubulina enriquecido en neuronas que forma heterodímeros con la α-tubulina para ensamblar microtúbulos y mantener la integridad del citoesqueleto. La dinámica de los microtúbulos impulsada por polímeros de tubulina regula la organización del huso mitótico, el transporte intracelular, el crecimiento de neuritas y la migración neuronal, vinculando a TUBB2B con procesos fundamentales como la división celular y el neurodesarrollo. Como componente del citoesqueleto de microtúbulos, la β2B-tubulina se integra en vías que controlan el transporte axonal y la estratificación cortical mediante interacciones con proteínas asociadas a microtúbulos y complejos motores. Las variantes patógenas en TUBB2B se han asociado con tubulinopatías y malformaciones del desarrollo cortical, lo que proporciona un punto de entrada genético para estudiar los mecanismos del citoesqueleto subyacentes a fenotipos del neurodesarrollo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO β2B Tubulin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TUBB2B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TUBB2B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TUBB2B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína β2B Tubulin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TUBB2B para la investigación de la señalización de β2B Tubulin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TUBB2B críticos para la función de β2B Tubulin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TUBB2B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido β2B Tubulin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido β2B Tubulin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TUBB2B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR β2B Tubulin (h) y el plásmido HDR β2B Tubulin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TUBB2B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TUBB2B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.